En 1922, la ligne de défense d’Amsterdam fut incorporée dans le 'Fort Hollande' (Vesting Holland). En temps de guerre, celle-ci devait être défendue avec acharnement. Elle comprenait la Hollande-Septentrionale au sud de la ligne Edam–Castricum, la Hollande-Méridionale et la partie occidentale de la province d’Utrecht. Les parties septentrionale et orientale de la ligne étaient donc maintenues comme ligne de défense, mais la fonction de ceinture fortifiée était caduque. Les autres forts sont restés en tant qu’objets militaires à l’intérieur du Fort Hollande, comme abris pour le personnel et le matériel.
Au cours des années trente, notamment lorsque la menace de guerre en Europe devient de plus en plus grande, le Fort Hollande est renforcé sur certains points. Ainsi, la partie orientale de la ligne de défense fut équipée de casemates en béton. Les inondations continuaient à jouer un rôle crucial dans la défense du pays. Peu avant l’éclatement de la seconde guerre mondiale, le gouvernement néerlandais décida de procéder à une mobilisation générale (août 1939) et la partie orientale du Fort Hollande fut partiellement inondée, cette partie coïncidant avec la Nieuwe Hollandse Waterlinie.
Ce n’est que lors de l’invasion allemande au mois de mai 1940, lorsque les Allemands menaçaient de traverser l’IJsselmeer à partir de la Frise, qu’un front nord du Fort Hollande (ce qui correspond à la partie septentrionale de la ligne de défense d'Amsterdam) fut mis en état de défense. Pour la première fois de l’histoire, cette partie de la ligne de défense fut réellement inondée. Il était toutefois évident qu'en raison de la tactique de guerre moderne, de l’utilisation massive d’avions et de l'engagement de troupes aéroportées, l’ancienne ligne de défense avait définitivement perdu son intérêt. Lors de l’occupation de 1940–1945, les tourelles blindées de la plupart des forts furent retirées et refondues au profit de l’industrie de guerre allemande. Le fort près de Spijkerboor, dans le polder de Beemster, est le seul de la ligne de défense d'Amsterdam à avoir conservé la tourelle blindée avec ses deux canons qui peuvent encore être visités.
